三菱厭氧包“三步法”操作指南

　　三菱厭氧包（AnaeroPack™系列）作為實驗室厭氧微生物培養的核心耗材，憑借“無需加水、無需催化劑”的便捷性，通過化學反應快速構建無氧環境（30分鐘內氧氣濃度降至0%，同步產生約21%CO?），廣泛適配臨床微生物檢測、環境菌種分離等場景。其“三步法”操作流程圍繞“安全取袋-快速密封-規范培養”設計，兼顧效率與精度，具體操作指南如下：

　　一、第一步：備樣取袋——基礎準備與規范操作

　　此步驟核心是確保厭氧包未接觸空氣前保持活性，避免提前反應影響效果，需把控“選型-拆封-取袋”三個關鍵動作：

　　適配選型：根據培養罐容積選擇對應規格厭氧包，標準2.5L培養罐匹配1袋AnaeroPack™-Anaero，3.5L罐需2袋，7.0L罐需4袋；若培養微需氧或嗜二氧化碳菌種，需對應選用AnaeroPack™-Microaero或AnaeroPack™-CO?型號。同時檢查鋁塑包裝完整性，若出現破損漏氣則需廢棄，避免失效產品影響培養。

　　精準拆封：用剪刀沿鋁塑包裝上側預設線剪開，動作需快速平穩，避免剪刀劃破內部紙袋。包裝剪開后立即取出紙袋，嚴禁打開紙袋——紙袋內的化學試劑（如氫硼化物、碳酸鹽復合物）為密封狀態，打開會導致試劑受潮失效，無法完成產氣反應。

　　樣品前置：取袋前需將接種好的培養基平板放入密封罐，平板堆疊高度不超過罐容積的2/3，預留足夠空間供氣體均勻擴散。若培養厭氧菌菌落計數，建議將平板倒置放置，防止冷凝水影響菌落形態。

　　二、第二步：密封啟動——快速操作與環境構建

　　此步驟是厭氧環境形成的關鍵，核心是“極速密封”，利用三菱厭氧包接觸空氣后的即時反應特性構建無氧體系：

　　即時入罐：取出紙袋后10秒內放入密封罐，避免長時間暴露導致提前產氣。若使用多袋厭氧包，需將其分散平鋪在罐底或罐壁兩側，禁止疊放——疊放會導致局部反應熱量積聚，影響產氣均勻性，甚至降低氧氣吸收效率。

　　密封檢查：放入紙袋后立即蓋緊密封罐蓋，旋轉罐蓋至聽到“咔嗒”鎖止聲，確保密封圈貼合罐口。可通過“按壓罐蓋測試”驗證密封性：輕壓罐蓋無明顯松動，松手后無氣流聲，即說明密封合格，防止外界空氣滲入破壞厭氧環境。

　　反應啟動：密封后厭氧包自動啟動反應，通過內部化學試劑吸收罐內氧氣，同步生成CO?，無需額外添加水或催化劑。此時罐體會輕微發熱（正常反應放熱），屬正常現象，可放置于室溫環境等待30分鐘，待反應完成后再移入培養箱。
 

　　三、第三步：培養廢棄——規范培養與安全處理

　　此步驟聚焦“環境控制-過程觀察-廢棄處理”，保障培養效果與操作安全：

　　恒溫培養：將密封罐放入培養箱，設置溫度需≤45℃，超出此范圍會導致厭氧包試劑失效，同時影響微生物生長活性。培養期間可通過透明罐壁觀察菌落生長情況，無需打開罐蓋——密封狀態下環境可穩定維持整個培養周期，打開會破壞無氧條件。

　　效果驗證：若需確認厭氧環境是否達標，可在罐內放置厭氧指示劑（如美藍指示管），若指示劑由藍色變為無色，說明氧氣已去除，可正常培養；若仍為藍色，需檢查密封是否失效或厭氧包是否過期。

　　安全廢棄：培養結束后，先將密封罐置于通風處冷卻30分鐘，待厭氧包降溫后再取出——反應殘留的化學試劑可能持續放熱，高溫狀態丟棄易引發風險。取出的廢袋需單獨丟棄，禁止與易燃物混放，避免殘余試劑發生意外反應。

　　關鍵注意事項與場景適配

　　儲藏要求：未使用的厭氧包需密封存放于陰涼干燥處，避免陽光直射與潮濕環境，鋁塑袋右下角印有失效期，需在有效期內使用，過期產品產氣效率會下降50%以上。

　　特殊場景：野外采樣或現場檢測時，可搭配三菱密封袋替代培養罐，操作流程不變，密封袋透明特性便于現場觀察，且重量僅為培養罐的1/10，便攜性更強。

　　常見誤區：禁止將不同型號厭氧包混合使用（如厭氧型與微需氧型），會導致氣體濃度紊亂；多袋使用時若空間有限，可借助隔板分隔，確保每袋均能充分接觸空氣完成反應。

　　通過“備樣取袋-密封啟動-培養廢棄”三步操作，三菱厭氧包可快速構建穩定厭氧環境，操作耗時僅需2分鐘，相比傳統厭氧培養箱成本降低60%，且能避免危險氣體使用風險，成為中小實驗室厭氧培養的優選方案。